首页 > 知识点总结 > 高中生物

微生物的实验室培养

考点详解

微生物的实验室培养知识点包括培养基、无菌技术、大肠杆菌的纯化培养、消毒与灭菌的比较、纯化微生物的接种方法、选择培养基与鉴别培养基的比较等内容,有关微生物的实验室培养知识点详情如下:

1.培养基

(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。

(2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。

(3)种类:按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。

2.无菌技术

(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。

(2)关键:防止外来杂菌的入侵。

(3)不同对象的无菌操作方法: [连线]

提示: ①②⑥—b—Ⅰ、Ⅱ ③④⑤—a—Ⅲ、Ⅳ

3.大肠杆菌的纯化培养

(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

①操作步骤:

 

②倒平板的方法及注意事项:

a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:

b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌

c.丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。

(2)纯化大肠杆菌的方法

①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。

②纯化大肠杆菌的关键步骤:接种

③常用的微生物接种方法有两种

a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。

(3)菌种的保存方法

①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。

②对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。

4.消毒与灭菌的比较

 

条件

结果

常用方法

应用范围

消毒

较为温和的物理或化学方法

仅杀死物体表面或内部的部分微生物

煮沸消毒法

日常用品

巴氏消毒法

不耐高温的液体

化学药剂

消毒法

用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源

灭菌

强烈的理

化因素

杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子

灼烧灭菌法

接种工具

干热灭菌法

玻璃器皿、金属用具

高压蒸汽

灭菌法

培养基及容器

5.纯化微生物的接种方法

项目

平板划线法

稀释涂布平板法

原理

通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即菌落

将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落

优点

可以观察菌落特征,对混合菌进行分离

可以计数,可以观察菌落特征

缺点

不能计数

吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延

适用范围

适用于好氧菌

适用于厌氧菌和兼性厌氧菌

6.选择培养基与鉴别培养基的比较

种类

制备方法

原理

用途

举例

选择培养基

培养基中加入某些化学物质

依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计

从众多微生物中分离所需的微生物

加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌

鉴别培养基

培养基中加入某种指示剂或化学药品

依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应,产生明显的特征变化而设计

鉴别不同种类的微生物

伊红­ 美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

最后编辑:2021-04-01 08:36:32

相关知识点

典型例题

【第1题】  

如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,据图分析下列问题:

(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是________________、________________。

(2)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成了一片,最可能的原因是

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________,为避免此种现象应当采取的措施是

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________。

(3)接种操作一定要在火焰附近进行是因为

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________。

【第2题】  

表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方,请结合所学知识,回答下列相关问题:

成分

含量

蛋白胨

10.0 g

乳糖

5.0 g

蔗糖

5.0 g

K2HPO4

2.0 g

显色剂(伊红­ 美蓝)

0.2 g

琼脂

12.0 g

将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

 

(1)根据用途划分,该培养基属于________培养基,若要分离能分解尿素的细菌,需对培养基做出的最关键的调整是________________,若还需鉴定分解尿素的细菌,需做出的调整是________________。

(2)从培养基的成分上看,大肠杆菌的同化类型为

_______________________________________________________________________。

该培养基能否用于分离筛选出大肠杆菌?为什么?

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________。

(3)在实验室培养微生物时,获得纯净培养物的关键是________________,紫外线可对空气进行灭菌的原因是

_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________。

(4)某同学尝试纯化大肠杆菌,其中一个平板的菌落分布如上图,推测该同学接种时可能的操作失误是

_______________________________________________________________________。