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选修1生物技术实践《课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段》最新教案优质课下载
二、. 教学重难点：
教学重点：PCR的原理和PCR的基本操作
教学难点：PCR的原理
三、教学过程
（一）、PCR的应用
播放《PCR之歌》，引入PCR的概念，特点，并和学生一起分析PCR在社会生活中有哪些应用。
PCR------聚合酶链式反应是1983年美国科学家Mullis提出的一种放大扩增特定的DNA片段的技术。只需要极少量的DNA做模板就能在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。目前被广泛的应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学和基因工程等方面。
（二）PCR的原理
1、复习DNA的基本单位和结构特点，看图说出细胞内的DNA复制的过程。
① 解旋酶断裂氢键，DNA双螺旋结构解开
② 以每一条单链为模板在DNA聚合酶的作用下合成子链
③ 新形成的每条DNA都有一条新链和一条旧链
复制特点: 边解旋边复制、半保留复制、遵循碱基互补配对原则
2、科学家将单链DNA、DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸加入试管中为什么没有复制出DNA？引入DNA聚合酶的作用特点。
DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。
3、什么是引物？需要几种引物？
感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成，还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次，只有碱基配对无误后才能继续往下聚合，它不能从头合成。RNA聚合酶没有校对功能，因此RNA的合成不需要引物，而是从头合成的，它的错配可能性较大，在RNA引物完成功能后即被DNA聚合酶I删去，代之以高保真的DNA链。
4、总结DNA复制需要的组分：模板链、DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸、解旋酶、2种引物。
5、PCR和细胞内DNA复制相比较有哪些条件不一样？
① 不需要解旋酶，利用DNA的热变性原理控制DNA双链的解聚和结合。
变性：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。 恢复性：在50℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。
② 需要耐高温的DNA聚合酶。
③ 复制条件：缓冲液、DNA模板、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、2种引物。
④反应场所：PCR仪 (自动温度周期性调节)。
讨论：缓冲液相当细胞内的什么成分? (细胞核基质)