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选修1生物技术实践《课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段》优质课教案下载
2.?? 教学重点/难点
教学重点:PCR的原理和PCR的基本操作
教学难点:PCR的原理
3.?? 教学用具
教学动画
网络视频资源
4.? 教学过程
PCR 简介:
多聚酶链式反应(polymerase chain reaction)简称PCR技术,是80年代中期发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术。此法操作简便,它能以极少量的DNA为模板, 可在短时间内在试管中获得数百万个特异的目的DNA序列的拷贝,这项技术有效的解决了因为样品中DNA含量太低难以对样品进行分析研究的问题。
PCR技术虽然问世仅数年时间, 但它已迅速渗透到分子生物学的各个领域,引起了生物技术发展的一次革命,目前它在分子克隆, 目的基因检测,遗传病的基因诊断,法医学,考古学等方面得到了广泛的应用。
一、基础知识回顾
1、时期:有丝分裂间期减数第一次分裂前的间期
2、场所:细胞核(主)、线粒体、叶绿体
3、基本条件: 酶、ATP、模板、脱氧核苷酸、
4、复制过程:
① DNA的解旋? ② RNA引物的合成
③ DNA的生成? ④切掉引物生成冈崎片断 ⑤ DNA片断的连接
展示:观察复制过程动画
5、复制特点: 边解旋边复制(过程)、半保留复制(结果)
思考与讨论:
1 通过观察DNA复制的过程,你认为DNA复制需要哪些酶参与?
2 为什么先合成一段RNA引物后才能实现脱氧核苷酸子链的延伸?
展示:DNA分子的结构,分析DNA分子是反向平行的。
展示:DNA复制的动画,分析两条子链的复制是不相同的。
分析:DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从已经存在的3’端延伸脱氧核苷酸子链。因此,DNA复制需要引物。