选修1 生物技术实践《第六章 蛋白质和DNA技术 14.蛋白质的提取和分离》优秀ppt课件

选修1 生物技术实践《第六章 蛋白质和DNA技术 14.蛋白质的提取和分离》优秀ppt课件

3、观察提取出来的DNA

实验思路

1、DNA从哪提取？

2、怎样将DNA与细胞中的其他物质分离？

3、怎样鉴定我们提取的DNA？

实验原理

1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

实验材料和用具

实验材料：

1、鸡血细胞液（5~10ml）；

2、体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；

3、蒸馏水；

4、质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸钠溶液； （抗凝剂）

5、物质的量浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的NaCl溶液；

6、二苯胺试剂。

实验用具：铁架台；铁环；镊子；三角架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯；（100ml，一个，50ml、500ml各二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。

8、DNA的鉴定

① DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂

②紫外灯照射法

A、配制染色剂，用蒸馏水配制万分之五的溴化已锭（EB）

B、将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色

C、将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射（暗室中），可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260 nm处)

③甲基绿 （蓝绿色）