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选修1生物技术实践《复习与测试》精品教案优质课下载
4.学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。
【学习重点】培养基的制备、微生物的培养的操作。?
【学习难点】培养基的制备和微生物的分离。?
【教材导读】
一、基础知识：阅读教材P14-16，分析回答下列问题。
（一）基础知识
1．培养基的配制原则是 目的要明确 、 营养要协调 和 PH要适宜
培养基的种类包括 固体培养基 和 液体培养基 。
琼脂是从红藻中提取的 多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
2．培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。此外，培养基还要满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。
【思考1】牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
【思考2】培养乳酸杆菌时需要添加维生素；培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性；
培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
（二）无菌技术
1．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
2．无菌技术包括：对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
3．比较消毒和灭菌（填表）
比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能【思考3】无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是防止感染实验操作者。
4. 消毒方法：生活经常用到的是煮沸消毒法；对一些不耐高温的液体则用巴氏消毒法；对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液，然后使用紫外线进行物理消毒；实验者的双手使用酒精进行消毒；饮水水源用氯气进行消毒；肌肉注射时所用的皮肤消毒剂有酒精、碘酒；皮肤擦伤后所用的消毒剂有结晶紫、红汞、H2O2等。
5．灭菌方法：接种环、接种针、试管口等用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；培养基、无菌水等用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。
6．对接种环灭菌时要是用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能深入试管的部位。
7．利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能太挤，目的是避免妨碍热空气流通。
8．高压蒸汽灭菌法：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内的冷空气，目的是有利于锅内温度升高；随后关闭排气阀继续加热，气压升至100kPa，温度为121℃，并维持15～30min；切断热源使温度自然降温，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸。
二、实验操作：阅读教材P16-20，分析回答下列问题
（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基