选修1生物技术实践《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》集体备课教案设计

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一、研究思路

1.筛选菌株

(1)PCR技术要用到一种关键酶—— ，这种酶只能在耐 环境的微生物中获得。

(2)微生物筛选的原理是：人为提供有利于 生长的条件(包括 、 、pH等)，同时 或阻止其他微生物的生长，该类培养基是 。

2.(1)在稀释涂布平板法和平板划线法两种方法中， 适合统计样品中活菌的数目。该方法要求对样品的稀释度要 ，确保一个菌落来源于 。

(2)用于活菌计数的平板要形成 个菌落。所统计的菌落数往往比活菌的实际数值要 ，原因是连在一起时观察到的仅是一个菌落。

3.设置对照：目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提 高实验结果的 。

二、实验设计

1.操作步骤：土壤取样→ →微生物的。

2.土壤取样一般要铲去 ，因为绝大多数细菌分布于距地表约 的土壤层。

3.样品的稀释：不同的微生物需要稀释的倍数不同，请填写下表

微生物稀释倍数细菌放线菌真菌

4.微生物的培养与观察

微生物的生长受 的影响，菌落的数目和 是观察的主要内容。

三、操作提示

1.无菌操作：取土样用的 和盛土样的 在使用前都需要灭菌。称取土样要在 旁进行。稀释样品要在 旁操作。

2.做好标记： 要对 和试管进行标记，尤其进行系列稀释时要按 顺序将试管排列成行。

四、课题延伸

分解尿素的细菌合成的 将尿素分解成了氨，使培养基的碱性增强。在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂培养细菌，若指示剂变 ，可以初步鉴定该种细菌能够分解 。

（一）、选择培养基

1.选择培养基的制作方法

(1)在培养基全部营养成分具备的前提下，依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培 养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉 素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌等。

(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。

(3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。

(4)通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。