《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》优质课教案设计

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二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、教学方法

启发式教学

五、教学工具

多媒体课件

六、教学过程

（一）新课导入

上一节课我们学习了微生物的培养，这节课我们来学习土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。请同学们阅读教材，掌握本课题的课题背景和目的。

课题背景： 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2 ，这是因为细菌能合成脲酶 。

本课题目的：①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌

②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌

（二）导引探究：PCR技术是一种常用的DNA扩增技术，此项技术的自动化，需要使用耐高温的DNA聚合酶，如果请你来找这种耐高温的酶，你会去哪里找？

1.筛选菌株

1.1科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 ，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长 。

1.2生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。PPT展示该课题培养基配方：

〖思考1〗该培养基对微生物 具有 （具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长 。

〖思考2〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 尿素和葡萄糖 ，提供氮源的的是 尿素 ，琼脂的作用是 凝固剂 。该培养基中共有4种营养物质

1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 稀释涂布平板法 。除此之外， 显微镜直接计数 也是测定微生物数量的常用方法。

【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。（例题）

每一个大方格边长为 1mm ，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm3。下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数是多少?

1ml菌液中的总菌数?(1ml=1cm3=1000mm3）　　

　　1．4 〖思考3〗为什么测平板上的菌落数可以推测样品中的活菌的数目？采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌 。通过统计平板上的菌落数 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 恰当的稀释度 。