选修1 生物技术实践生物《生物技术概述 第一部分 微生物的利用 实验3 观察土壤中能水解纤维素的微生物》精品课课件

选修1 生物技术实践生物《生物技术概述 第一部分 微生物的利用 实验3 观察土壤中能水解纤维素的微生物》精品课课件

为获得高效纤维素降解菌,以期用于陇南成县玉米秸秆资源的再利用.采用CMC-Na刚果红鉴定初筛培养基和发酵复筛培养基从成县玉米耕种区筛选高效纤维素分解菌,并获得了一株活力较高的菌株,经刚果红鉴定透明圈直径可达24.1 mm,同时经16 sRNA分子鉴定,结合16s-r DNA序列系统发育树分析,鉴定为产二素链霉菌.将该菌株接种于不同碳源的培养基中测其酶活,发现该菌株在24 h内可将滤纸几乎完全瓦解,同时该菌的羧甲基纤维素钠酶活力、对滤纸酶活力和玉米秸秆的酶活力分别达到:5.32 U/m L、6.43 U/m L、25.24 U/m L.因此该菌株在后期秸秆资源的再利用方面具有很高的应用价值.

6SrRNA为核糖体的RNA的一个亚基，16SrDNA就是编码该亚基的基因。细菌rRNA（核糖体RNA）按沉降系数分为3种，分别为5S、16S和23S rRNA。16S rDNA是细菌染色体上编码 rRNA相对应的DNA序列，存在于所有细菌染色体基因中。

16S rDNA是细菌的系统分类研究中最有用的和最常用的分子钟，其种类少，含量大（约占细菌DNA含量的80%），分子大小适中，存在于所有的生物中，其进化具有良好的时钟性质，在结构与功能上具有高度的保守性，素有“细菌化石”之称。在大多数原核生物中rDNA都具有多个拷贝，5S、16S、23S rDNA的拷贝数相同。16S rDNA由于大小适中，约1.5Kb左右，既能体现不同菌属之间的差异，又能利用测序技术较容易地得到其序列，故被细菌学家和分类学家接受。 [1]?

原菌液浓度过大这里不再考虑

10倍稀释的菌液经培养发现其菌落数量仍过多远超300个于是不做记录与分析

100倍稀释的菌液培养出的菌落效果比较好，是我们做的这几组实验当中菌落数量最适中的。实验数据入如右下表格。

1000倍稀释的菌液培养出的菌落比较稀疏，由实验数据判断稀释一千倍的菌液得到的菌落数量过少，而单菌落的面积最大。培养基状况如左下，实验数据如右下表格。

分离土壤中水解纤维素的菌株

提出问题：法海寺森林公园枯枝残叶过多，在气候干燥条件下容易诱发火灾

解决思路：利用微生物的降解作用

从土壤中分离出能水解纤维素的菌株，并检测其水解纤维素的能力

制定实验流程：

采集土样

制备土壤浸出液

分离纯化菌种

目的菌株的筛选与鉴定

目的菌株的保藏与扩大培养

稀释涂布平板法

刚果红纤维素平板初步鉴定