人教2003课标版《课题3血红蛋白的提取和分离》公开课教案下载

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课题难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

【导学诱思】

思考1：分离生物大分子的基本思路是什么？

思考2：蛋白质的分离和提取的原理是什么？

思考3： 高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用，作用结果是什么被破坏？

思考4：人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？

一、基础知识：

㈠ 凝胶色谱法（分配色谱法）：

1、概念：根据被分离蛋白质的 ，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来分离蛋白质的有效方法。

2、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ，而 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 ，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。

3、具体过程：

A. 的蛋白质由于 作用进入凝胶颗粒内部而被滞留； 的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在了里之间迅速通过。

B.（1） 混合物上柱；

（2）洗脱开始， 的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内； 的蛋白质被排阻于凝胶颗粒之外；

（3） 的蛋白质被滞留； 的蛋白质被向下移动。

（4） 不同的蛋白质分子完全分开；

（5） 的蛋白质行程较短，已从 中洗脱出来， 的蛋白质还在行进中。

㈡ 缓冲溶液：

1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。

2、作用：能够抵制 的对溶液的 的影响，维持PH基本不变。

3、缓冲溶液的配制

通常由 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的 就可以制

得 使用的缓冲液。

思考：说出人体血液中缓冲对？

思考：在血红蛋白整个实验室中用的缓冲液是什么？它的目的是什么？