《课题3血红蛋白的提取和分离》优质课PPT课件下载

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1、主要概念：①凝胶色谱法 ②电泳法 ③缓冲溶液 ④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。

2、主要原理：①凝胶色谱法分离蛋白质的原理 ②电泳法分离样品的原理 ③缓冲溶液的组成和作用机理

3、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法

4、课题难点：①样品的预处理 ②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

学习目标

一、凝胶色谱法（分配色谱法）

根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。

大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。

⑴.概念：

⑵.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程

⑶.凝胶色谱法的原理—分子筛效应：

当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

▲依据的特性是：蛋白质分子量的大小。

凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示

二、缓冲溶液

1.概念:

在一定的范围内，凡是能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原来溶液pH值基本保持不变的混合溶液。

2.缓冲溶液的组成举例：

H2CO3 —— NaHCO3、CH3COOH —— CH3COONa

NaH2PO4 —— Na2HPO4、KH2PO4 —— K2HPO4

3.缓冲溶液的配制

在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

琼脂糖凝胶电泳示意图

⑴.概念：

带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。