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限制酶：
（1）来源：主要从 生物中分离纯化而来；
（2）作用：识别 并切开特定部位的两个核苷酸之间的 ；
（3）结果：产生 或平末端；
2.DNA连接酶：
（1）作用：将限制酶切割下来的DNA片段 ；
（2）类型： 和T4 DNA连接酶；
原核
特定序列
磷酸二酯键
粘性末端
拼接成DNA分子
E?coli DNA连接酶
3.载体：
（1）常用载体是 ；
（2）作为基因表达载体所需的元件：
目的基因、 、 、标记基因。
质粒
启动子
终止子
思考1： 表达载体为什么一定要有启动子？
生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能有利于基因的表达；
思考2：终止子的作用是什么？
终止子是位于基因尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录。
思考3：标记基因有什么作用？