选修3现代生物科技专题《复习与测试》新课标PPT课件优质课下载

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标记基因是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是重组DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否，比如抗生素抗性基因；在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位，比如著名的GFP基因。

深入思考：2、假如想把人的胰岛素基因导入大肠杆菌来生产胰岛素，按上述图示过程能成功吗？为什么？

补充内容

基因组文库与部分基因文库的关系

深入思考：3、基因组文库中的胰岛素基因和cDNA文库中的胰岛素基因有哪些区别？为什么有这些区别？

补充内容

引物设计原则

引物设计是一小段单链DNA或RNA，在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链。

1、长度：15—30bp，其有效长度一般不大于38，否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度)，从而降低产物的特异性。

2、G十C含量：应在40%一60%之间。

3、碱基分布的随机性：应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C，否则会使引物在G十C富集序列区错误引发。

4、引物自身：不能含有自身互补序列，否则会形成发夹样二级结构。

5、引物之间：两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基，不然会形成引物二聚体，尤应避免3’端的互补重叠。

6、上下游引物的互补性：一个引物的3‘末端序列不允许结合到另一个引物的任何位点上。

7、3’末端：如果可能的话，每个引物的3‘末端碱基应为G或C。

8、引物应当超出限制性内切酶识别位点至少3个核苷酸。

作业反馈

走近高考

补充内容：融合基因

作业反馈

分子杂交是确定单链核酸碱基序列的技术，其基本原理是待测单链核酸与已知序列的单链核酸（探针）间通过碱基配对形成可检出的双螺旋片段。依据图示判断下述错误的是

A.该技术也可在DNA与DNA，RNA与RNA，或DNA与RNA之间进行，形成DNA-DNA，RNA-RNA或RNA-DNA等不同类型的杂交分子

B.在杂交前先把待分析的DNA加热使之变性,分开成单链，作为探针的核酸片段一般为30～50核苷酸，降温退火的温度比长片段核酸探针低

C.不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序就可以形成杂种双链，短探针特异性比长探针的特异性高，假阳性率低

D.核酸探针加入放射性同位素标记便于放射自显影检出，但标记物不能影响探针的特异性